Ayuda a diferenciar los estafilococos coagulasa positivos,
como el Staphylococcus aureus, de otros negativos a esa prueba, que en general,
son menos patógenos. Su utilidad radica en las diferencias macroscópicas de las
colonias que pueden crecer en él, especialmente el color, y en la selectividad
hacia los cocos Gram positivos, inhibiendo algunos otros microorganismos, como
las enterobacterias.
Los cocos Gram positivos en racimos, que resultan ser coagulasa
positivo (como por ejemplo S.aureus) presentan colonias amarillas distintivas
(a menudo descritas como color dorado). Mientras que los microorganismos coagulasa
negativos (como el S. epidermidis) crecen en
colonias usualmente blancas o incoloras, y algunas veces color naranja
pálido, como en el caso de los micrococos.
Microscópicamente todos los estafilococos son cocos Gram positivos
en racimos (positivos a la reacción de la catalasa); macroscópicamente, en Agar
Manitol Salado, el S. aureus presenta colonias amarillas medianas, mientras que
S. Epidermidis crece formando colonias blancas, pequeñas a medianas; los
micrococos que también reaccionan negativamente a la coagulada, se presentan en
colonias incoloras o naranjas, de pequeñas a medianas.
Prueba Bioquímica para Enterobacterias, TSI
Este medio contiene glucosa a una concentración de 0.1%,
además de sacarosa y lactosa, esta última a una concentración 10 veces mayor
que la de glucosa, lo cual permite la observación de fermentación de uno o
ambos carbohidratos por parte de las bacterias cultivadas. Cuando los
Microorganismos fermentan solo glucosa se produce una reacción de álcalis sobre
ácido descrita como: K/A. lo cual indica que el pH del tubo es alcalino (K) en
el pico de flauta (superficie) mostrando un color rojo, mientras que en el
fondo de tubo es ácido (A) mostrando un color amarillo. Cuando los
microorganismos fermentan dos o más azúcares todo el tubo muestra pH ácido
(A/A) cambiando de color hacia el amarillo.
Posee como
indicador el rojo fenol, si el medio se vuelve ácido debido a la producción de
lactato por la fermentación de los azúcares, el indicador vuelve el medio
amarillo; mientras que si hay alcalinidad debido a la liberación de amoníaco,
que es producto final del consumo de peptonas (fuente de energía alterna al
agotar los azúcares viables), el medio se torna rojo.
Cambios de pH en otras pruebas bioquímicas y su evidencia por cambio de color
Ureasa: Su
indicador es también el rojo fenol, que revela un tono de rojo “buganvilia” al
reaccionar con el amonio y CO2 que se libera producto del desdoblamiento de la
Urea presente en el medio, solo sí la bacteria inoculada posee la enzima ureasa
necesaria; de lo contrario el medio continúa de color amarillo pálido.
Citrato: El
indicador azul de bromotimol se encarga de cambiar el medio de verde a un azul
intenso, solo si se encuentra con la presencia de carbonatos y bicarbonatos
producto del metabolismo del citrato por parte de la bacteria inoculada.
Ornitina: el
medio MIO posee tanto glucosa como el indicador púrpura de bromocresol, la
bacteria inoculada consumirá la glucosa, acidificando el medio con su
fermentación, por lo que se torna amarillo; pero si posee la enzima ornitina
descarboxilasa también producirá putresina, la cual alcaliniza fuertemente el
medio reaccionando con el indicador y manteniendo el color púrpura.
Enterobacterias más representativas y su reacción a las pruebas bioquímicas
Según sus especies más frecuentes. El siguiente cuadro
agrupado por género, resume el resultado esperado para las pruebas de TSI, MIO,
Voges Proskauer, Rojo de Metilo en MIO, Urea y Citrato.
Género
|
Fer
|
Gas
|
H2S
|
Mov
|
In
|
Or
|
VP
|
RM
|
U
|
Cit
|
Enterobacter
|
A/A
|
++
|
-
|
+
|
-
|
+
|
+
|
-
|
-
|
+
|
Escherichia
|
A/A
|
+
|
-
|
+
|
+
|
+/-
|
-
|
+
|
-
|
-
|
Citrobacter
|
A/A
|
+
|
+/-
|
+
|
+
|
++/-
|
-
|
+
|
-
|
+
|
Klebsiella
|
A/A
|
++
|
-
|
-
|
-
|
-
|
+
|
+/-
|
+
|
+
|
Morganella
|
A/A
|
-
|
+
|
+
|
+
|
-
|
+
|
-
|
-
|
|
Proteus
|
K/A
|
-
|
+
|
+
|
-
|
+/--
|
-
|
+
|
++
|
+
|
Salmonella
|
K/A
|
-
|
+
|
+
|
-
|
+/-
|
-
|
+
|
-
|
+
|
Shigella
|
K/A
|
-
|
-
|
-
|
+/-
|
+/-
|
-
|
+
|
-
|
-
|
Serratia
|
A/A
|
+
|
-
|
+
|
-
|
+
|
+
|
+/-
|
-
|
+
|
Yersinia
|
K/A
|
-
|
-
|
-
|
+/-
|
+/-
|
-
|
+
|
-
|
-
|
En el
cuadro se muestran: El medio TSI por fermentación, gas, y ácido; el medio MIO
con movilidad, indol, y ornitina. Además de algunas pruebas complementarias. La
simbología de más cruces denota una marcada positividad mientras que el símbolo
ambiguo (+/-) explica la existencia de reacciones variables dentro del género
producto de las diferentes especies.
Algunos ejemplos de estas pruebas:
Escherichia coli:
· TSI: A/A, Presencia de Gas, sin ácido
· Citrato: Negativo
· Urea: Negativo
· Movilidad: Presente
Klebsiella:
· TSI: A/A, Presencia de Gas, sin ácido
· Citrato: Positivo
· Urea: Positivo
· Movilidad: Ausente
Shigella:
· TSI: K/A, Sin Gas, sin ácido
· Citrato: Negativo
· Urea: Negativo
· Movilidad: Ausente
Pseudomona:
· TSI: K/K, No Gas, No ácido
· Citrato: Positivo
· Urea: Negativo
· Movilidad: Presente
